A escolha de um método analítico adequado desempenha um papel fundamental na obtenção de resultados confiáveis e precisos em diversas áreas científicas, e com a crescente demanda por análises de alta qualidade e a evolução constante das técnicas analíticas, torna-se essencial compreender os requisitos necessários para a seleção adequada de um método analítico.
Este artigo discute os principais critérios que devem ser considerados ao escolher um método analítico, levando em conta fatores como a natureza da amostra, o objetivo da análise, a sensibilidade requerida, a precisão e robustez. Além disso, aborda a cromatografia uma ferramenta poderosa e versátil para a separação, identificação e quantificação de componentes em uma amostra.
Ao compreender os requisitos necessários para a escolha de um método analítico, os profissionais poderão tomar decisões embasadas, garantindo a confiabilidade dos resultados obtidos e contribuindo para a obtenção de dados de alta qualidade.
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O método cromatográfico
A cromatografia é um metodologia físico-química que permite a separação de misturas. Esta técnica possui a fundamentação de migração diferencial dos componentes desta mistura dadas pela diferença de interação entre a fase móvel e a fase estacionária.
O método cromatográfico é basicamente “a configuração” em que o cromatógrafo líquido de alta eficiência opera. Ou seja, neste método cromatográfico desenvolvido e validado, você seleciona tipo de fase móvel, tipo de fase estacionária, vazão da fase móvel de trabalho e tipo de detector.
Este método deve possuir diversos parâmetros comprovados como seletividade, linearidade, robustez, precisão, exatidão, limite de quantificação e limite de detecção. É essencial que essas análises possuam reprodutibilidade para que outros analistas possam utilizar seu método cromatográfico como referência.
A escolha do método analítico
Para escolha do método analítico a ser utilizado, você deve avaliar a natureza físico-química da amostra, além de saber se estará lidando com uma fase estacionária polar ou apolar para que a fase móvel seja selecionada adequadamente.
Na escolha do método cromatográfico, você irá avaliar aqueles parâmetros citados anteriormente:
Seletividade
Este parâmetro do método cromatográfico ocorre pela medida seletiva de um determinado composto na presença de outros, ou seja, na presença de interferentes, que possam influenciar na sua identificação e quantificação.
Deve sempre se atentar para a garantia de pureza de picos cromatográficos, além de resolução, sem nenhum outro pico sobressaindo sobre o analito de interesse (ou de qualquer outro). São pouquíssimos métodos específicos para somente um analito, por isso, a seletividade é um dos principais parâmetros a serem avaliados;
Linearidade
A linearidade é um método que permite avaliar a capacidade do método cromatográfico, dentro de um intervalo específico, demonstrar resultados diretamente proporcionais às concentrações empregadas;
Exatidão
Você deve avaliar este parâmetros pois ele indica o grau de concordância entre o valor que é aceito como teórico ou um valor de referência e os resultados reais obtidos pela análise cromatográfica.
A exatidão é expressa pela relação entre a concentração média determinada de forma experimental e a concentração teórica correspondente;
Precisão
Um método preciso apresenta a concordância entre os resultados de várias medidas de uma mesma amostra. Ou seja, sempre que a mesma amostra for analisada outras vezes, no mesmo dia, pelo mesmo analista e no mesmo laboratório (representando repetibilidade) e em dias diferentes, com analistas diferentes e, até mesmo em outros laboratórios (representando reprodutibilidade) os valores devem ser próximos;
Robustez
A robustez vai indicar o quão confiável é o método cromatográfico. Medido a partir da capacidade do método analítico em resistir a pequenas e deliberadas mudanças nas condições cromatográficas, visto que, nem sempre é possível os mesmos reagentes e equipamentos que o método foi validado.
Limite de detecção e quantificação
Por fim, o limite de detecção (LD) e limite de quantificação (LQ) são determinados pela menor quantidade do analito capaz de ser identificada (porém não necessariamente quantificada) e a menor quantidade do analito capaz de ser quantificada, com precisão e exatidão, respectivamente.
Escolha certa para resultado confiável
A avaliação destes parâmetros é essencial para que o método cromatográfico seja escolhido adequadamente e assim você possua resultados confiáveis.
No entanto, a resolução brasileira e, até mesmo o ICH e a farmacopeia americana, reconhecem que não há a necessidade de serem avaliados todos esses parâmetros de validação, ficando a critério e responsabilidade do analista definir quais os parâmetros que serão avaliados, uma vez que, o tipo de método e o seu propósito vão determinar o desenvolvimento do processo.
Esperamos que nosso conteúdo tenha sido útil e informativo. E não esqueça: se precisar de padrões de referência ou colunas cromatográficas, fale conosco!
