Cromatografia gasosa é um tipo de cromatografia bastante utilizada na química orgânica para separar compostos que podem ser vaporizados sem decomposição.
A cromatografia gasosa possui como fundamentação a separação de substâncias de uma amostra, desde que elas sejam voláteis.
As características adequadas de uma amostra para ser analisada em cromatografia gasosa é possuir estabilidade térmica e ponto de ebulição de até 300 ºC.
Assim como as outras técnicas cromatográficas, a cromatografia gasosa possui uma fase estacionária e uma fase móvel.
A fase estacionária é constituída de partículas sólidas ou líquido sobre sólido, enquanto a fase móvel é composta por um gás, chamado “gás de arraste”, que deve ter alto grau de pureza, além de não interagir com a amostra.
Os gases podem ser argônio, hélio, hidrogênio e nitrogênio, sendo o hélio e o nitrogênio os gases mais utilizados.
Quais as colunas usadas para a cromatografia gasosa?
A coluna cromatográfica é o instrumento mais importante, a qual permanece em um forno termostaticamente controlado.
Existem dois principais tipos de colunas utilizados em cromatografia gasosa: as colunas recheadas (chamadas também de empacotadas) e as colunas capilares e são diferenciais de acordo com seu diâmetro, comprimento e material.
- As colunas recheadas ou empacotadas são normalmente feitas de aço inoxidável ou cobre, possuindo diâmetros de 3 – 6 mm e comprimento de 0,5 – 5 m. As fases estacionárias utilizadas nesse tipo de coluna podem ser partículas de sólidos ou líquidos sobre sólido.
- As colunas capilares são usualmente produzidas de material metálico, possuindo diâmetros que variam de 0,1 – 0,5 mm e tamanho de 5 – 100 m. As colunas capilares são as mais utilizadas nas análises cromatográficas devido a fornecer uma melhor resolução de separação. A fase estacionária utilizada nas colunas capilares é do tipo líquido sobre sólido.
Nas duas colunas cromatográficas, quando se utiliza fase estacionária composta por partículas de líquido sobre sólido, o líquido deve ter alto ponto de ebulição.
Ainda a fase estacionária pode ser polar, por exemplo quando se utiliza polifenóis; apolar, utilizando hidrocarbonetos saturados ou intermediária, quando a fase estacionária é composta por cetonas e ácidos carboxílicos.
Além disso, nas colunas capilares dois tipos são utilizados: colunas capilares com paredes recobertas (WCOT) na qual a fase estacionária é ligada de forma direta a parede do tubo; e colunas capilares com suporte recoberto (SCOT) onde há uma camada de suporte sólido que está depositada a parede interna do tubo e recoberta com a fase estacionária.
Escolhendo a coluna cromatográfica
Como citado acima, até alguns anos atrás as colunas capilares só funcionavam com fase estacionárias líquidas, no entanto, hoje é possível a obtenção de colunas abertas tubulares com camada porosa (PLOT), onde uma camada bastante fina de adsorvente sólido é colocada homogeneamente na parede interna da coluna.
Contudo, a estabilidade mecânica desse tipo de coluna não é tão boa quando comparada com as colunas capilares que possuem fases líquidas, sendo necessários muito mais cuidados ao utilizá-las.
O tamanho da coluna
O tamanho da coluna possui certa influência na separação cromatográfica, uma vez que, quanto maior a coluna maior será resolução entre os picos cromatográficos, no entanto o tempo de eluição aumenta de forma proporcional, consequentemente, gerando um maior custo a análise, visto que a utilização de mais gás de arraste será necessário.
De forma geral, as colunas que possuem tamanho de 25 m fornecem resultados adequados com excelentes resoluções, no entanto, colunas menores como de 10 m podem ser usadas para fornecer separações rápidas, desde que as substâncias analisadas sejam consideradas relativamente simples.
Inclusive, quando estamos necessitando separar compostos em amostras mais complexas, a alternativa contrária pode ser a solução, utilizando-se colunas mais longas que 25 m.
Ainda, como em colunas capilares a fase estacionária é encontrada na forma de um filme fino, a espessura desse filme pode influenciar na escolha da coluna a ser utilizada.
Filmes menores que 0,2 mm são preferivelmente requisitados em análises de compostos de alto peso molecular e ponto de ebulição; enquanto, filmes que possuem espessuras maiores que 0,5 mm são escolhidos em amostras de compostos bastante voláteis.
O aumento na espessura do filme, aumenta proporcionalmente a temperatura de ebulição do soluto, fazendo com que colunas menores sejam a primeira escolha.
Outro parâmetro a ser avaliado ao escolher a coluna cromatográfica para a cromatografia gasosa é o seu diâmetro.
A utilização de colunas que possuem o diâmetro de 0,1mm, possibilita obter resultados de resolução muito altas, no entanto podem proporcionar e apresentar algumas desvantagens.
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